叶绿素含量测定：粮食叶绿素含量的测定分析

 叶绿素含量测定，尤其是粮食叶绿素含量的测定分析，常见于各类植物，尤其是高等植物，同时，叶绿素也是其他拥有光合作用系统的生命体的必需色素。绿素易溶于乙醇、丙酮、甲醇等。

叶绿素含量测定：粮食叶绿素含量的测定分析

一、卡文思叶绿素测定方法

采用乙醇或丙酮提取比色法测定叶绿素含量。

二、卡文思叶绿素测试实验原理

香草醛酸性试剂与酚类化合物会起颜色反应，可用于酚类化合物的定性和定量分析。为避免其他成分干扰，需进行合理的前处理方式，并进行干扰分析。

三、卡文思叶绿素测定器材及试剂

分光光度计、高效液相色谱仪等；
香草醛、甲醇、乙醇、乙酸等。

四、卡文思叶绿素含量测定实验步骤

①儿茶素的提取

取1g样品，加适量石英砂和95%乙醇研磨，离心，取上清液，重复3次。合并上清液，用95%乙醇定容至25ml，得到测试品溶液，待用。

②对照品溶液的制备

用电子天平精确称量7.81mg干燥至恒重的儿茶素标品，使用无水乙醇进行溶解，定容到100.0ml的容量瓶中，得到对照品溶液。

③测定波长的确定

精确称量2.0ml的儿茶素对照品溶液，将其放入10.0ml的容量瓶中，经无水乙醇进行定容处理。将无水乙醇作为对照品，通过紫外分光光度计进行扫描，波长范围为200nm～600nm，确定吸收最大的波长。

④标准曲线的绘制

分别从10.0ml的容量瓶中精确吸取对照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml、6.0ml，将其经无水乙醇定容充分混合后，以无水乙醇作为参照，分别测量其吸光度。以对照品浓度为横坐标x，以吸光度为纵坐标y，进行标准曲线的绘制，以考察其存在的线性关系。

⑤样品测定

吸取15μl待测样品于硅胶薄层板上，以三氯甲烷：甲醇：甲酸=28：10：1为展开剂，展开至合适的位置后，取出晾干。用1%的香草醛盐酸溶剂喷雾显色，拍照记录分离情况。

将未显色的硅胶薄板在紫外灯下划出相应的斑点，刮下，用甲醇提取、离心，上清液定容至1ml。用高效液相色谱仪测定。

⑥稳定性实验、加样回收率实验及精密度实验